蛋白质磷酸化修饰是一类重要的翻译后修饰,通过磷酸化/去磷酸化修饰调节细胞活性。磷酸化修饰异常会导致多种疾病,包括癌症或神经变性疾病,如阿尔茨海默病和帕金森病。尽管对蛋白磷酸化的了解能够帮助我们理解人体生理和病理的发生过程,进一步可将其转化用于药物开发和病理诊断,但是磷酸化蛋白质丰度低,导致分析复杂生物样品的磷酸化困难。因而亟需新的技术用于磷酸化蛋白的富集。
通常情况下研究人员在进行质谱分析之前,利用离子交换层析或亲和捕获层析如金属氧化物亲和层析富集消化的蛋白中的磷酸肽。吉林大学贾琼博士的研究小组利用与MALDI-TOF质谱耦合的微芯片实现了金属氧化物亲和层析富集磷酸化蛋白。
研究人员首先合成了氧化铟官能化磁性纳米颗粒,在外部磁场的帮助下,将这种磁性颗粒用于芯片中的固相萃取吸附剂。这项技术不仅能测试β-酪蛋白,牛血清白蛋白和卵清蛋白这些标准蛋白,还能用于“真实的”复杂样品(包括牛奶和人血清)的测试。结果显示,具有In2O3涂层的Fe3O4磁性纳米颗粒的MALDI-TOF 质谱系统具有高度的特异性和可重复性,并且灵敏度高,最低能检测4 fmol的磷酸肽。
相关工作发表于Proteomics (DOI: 10.1002/pmic.201700213)
作者:Dandan Jiang, NaizhongSong, Xiqian Li, Jiutong Ma, Qiong Jia
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相关英文报道:http://www.advancedsciencenews.com/chip-magnetic-nanoparticles-phosphoproteomics/
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